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这就解释了为什么所有体细胞都共享一个基因组,但血红蛋白只能在红细胞内合成,胰岛素只能在胰岛β细胞中生产。”
“最后,艾伦·克鲁格发现,tfiiia之所以可以特异性结合dna,是因为它有个dna识别模块。
其中数十个氨基酸围绕在游离的锌离子周边,形成一个像手指一样的立体结构,这就是锌指。”
“很好。”
卢赫连连点头,“然后呢?”
“然后?然后不就是一个锌手指能够识别三个碱基序列,把多个锌手指组合在一起,连接上核酸内切酶,不就能完成特异性识别并且咔嚓一下子剪断dna了嘛?”
菜菜说完得意地眨着眼睛望着卢赫,好像在说:快表扬我。
“没了?”
卢赫追问道。
“没啦呀。
3个碱基表征一个氨基酸,理论上氨基酸也就只有64种,找到对应的64个锌手指,排列组合在一起,实现对靶标基因的精确定位。”
“唉。
。
。”
卢赫叹气道,“姑娘你还是太年轻。
言之易,行之难。
我之前总跟你说锌指组装起来很难你知道为什么吗?”
“对呀!
为什么呀?按原理来看,组装锌指不就是有手就能干的事嘛?”
“因为锌指之间是会互相干扰的。
比如,你想要组一个能特异性识别ggtaagatc的锌指。
你以为是把ggt、aag、atc对应的三个锌指粘起来就行了吗?不是的。
锌指之间会互相干扰,ggt的锌指会稍微摸到agg的a一点,同样atc的锌指也会暗戳戳地碰一下agg的g,反之亦然。
这相当于有效的识别序列被模糊成了ggnnanntc,使特异性结合的能力大大下降,脱靶能脱到姥姥家去。”
菜菜听后蹙起眉头,嘟着嘴默默沉思。
“不过克鲁格找到了一个十分‘优雅’的方式,解决了这个问题。
每一个3碱基序列都有可能对应多个锌手指,早在30年前就积累出大几百个了,总能找到两个能和谐共处的锌指。
对于ggtaagatc来说,可以先找到和谐相处的ggt-aag(a),再找到和谐相处的aag(b)-atc,最终再搜寻出一个aag(c)使它和aag(a)、aag(b)结构类似,问题就解决了。”
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“通过6个人就能认识全世界?”
菜菜惊叹道。
“没错,就是这个道理。”
卢赫点头称赞,“不过,虽然原理简单,但做起来很难。
实际的锌指组装是一个极其困难且复杂的过程。
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